總皂苷（Saponin ）含量試劑盒說(shuō)明書

微量法 100T/96S

總皂苷含量試劑盒 抗氧

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

皂苷（Saponin）是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷，主要分布于陸地高等植物中，也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠(yuǎn)志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮(zhèn)靜、抗癌等有價(jià)值的生物活性。

測(cè)定原理：

使用超聲波提取樣品中的皂苷，利用香cao醛-高氯酸顯色體系測(cè)定總皂苷含量。

組成：

自備儀器和用品：

酶標(biāo)儀、烘箱、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96 孔板、高氯酸、乙酸、超聲波清洗器

測(cè)定步驟:

1、酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 589nm。

2、測(cè)定管：取 0.5ml 上清，70℃揮發(fā)至干。加入 0.2ml 試劑一和 0.8ml 試劑二，55℃水浴 20min。吸取 40μl

加入 96 孔板中，再加入 200μl 試劑三，充分混勻后，589nm 下測(cè)定吸光度A1。

3、空白管：取 0.5ml 提取液，70℃揮發(fā)至干。加入 0.2ml 試劑一和 0.8ml 試劑二，55℃水浴 20min。吸取

40μl 加入 96 孔板中，再加入 200μl 試劑三，充分混勻后，589nm 下測(cè)定吸光度A2。計(jì)算△A= A1-A2。

總皂苷含量計(jì)算：

以齊墩guo酸為對(duì)照品計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為：y = 0.0036x - 0.012，R2 = 0.9968，x 為對(duì)照品濃度，μg/ml,y 為吸光度△A。總皂苷含量(μg/g 干重)=（△A+0.012）÷ 0.0036×V 樣÷(V 樣÷V 樣總×W)

=277.78×（△A+0.012）÷W

以人參皂苷Re 為對(duì)照品計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為：y = 1.0233x - 0.0016，R2 = 0.9983，x 為對(duì)照品濃度，mg/ml,y 為吸光度△A?？傇碥蘸?μg/g 干重)=（△A+0.0016）÷ 1.0233×V 樣÷(V 樣÷V 樣總×W)×1000

=977.23×（△A+0.0016）÷W

V 樣：加入樣本體積，0.5ml；V 樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣本干重，g；1000，毫克到微克的換算系數(shù)。

總皂苷含量試劑盒 抗氧