全血基因組DNA提取試劑he(磁珠法）質(zhì)粒提取

NobleRyderDM9688  全血基因組DNA提取試劑he(磁珠法） Whole blood genomic DNA extraction kit (magnetic particles)

產(chǎn)品貨號：DM9688

產(chǎn)品名稱：全血基因組DNA提取試劑he(磁珠法）Whole blood genomic DNA extraction kit (magnetic particles)

英文名稱：Whole blood genomic DNA extraction kit (magnetic particles)

產(chǎn)品規(guī)格：100T/50T

產(chǎn)品簡介：

儲存條件：Store at RT，1 year.

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderDM9688  全血基因組DNA提取試劑he(磁珠法）適用于從抗凝處理的全血樣品中快速、高效地提取基因組DNA。提取過程采用超順磁性微球，無需離心操作；使用預(yù)制的緩沖液，可直接進(jìn)行提取，無需預(yù)先去除紅細(xì)胞。本產(chǎn)品既可以手動進(jìn)行少量樣品的提取，也適合于用自動化工作站進(jìn)行高通量操作。提取的產(chǎn)物可用于酶切、PCR擴(kuò)增、檢測等后續(xù)實驗。

準(zhǔn)備工作： 

漩渦振蕩器 旋轉(zhuǎn)混合儀 恒溫水浴鍋/金屬?。?5℃

磁性分離器：磁性分離器

操作步驟：

使用前請先在洗滌液加入異丙醇/無水乙醇，加入試劑體積請參照瓶體上的標(biāo)簽（50T/100T的洗滌液1需單獨加入15mL/30mL 的異丙醇，50T/100T 洗滌液Ⅱ需單獨加入 24mL/48mL的無水乙醇）。 蛋白酶K溶液配置：取1mL溶酶液加入到20mg蛋白酶K  fen末中，配成20mg/mL的蛋白酶K溶液，配好的蛋白酶溶液-20℃保存。

1. 取一個新的1.5mL 離心管，加入200μL的抗凝血液樣品（不足200μL時可用PBS或洗脫液補(bǔ)足），再分別加入20μL蛋白酶K、2μL RNase A和500μL的裂解液，以渦旋振蕩器最大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10s后，置于60℃水浴5min。

2. 加入450uL異丙醇和10μL的磁珠（磁珠使用前需wan全震蕩混勻），以渦旋振蕩器最大轉(zhuǎn)速漩渦震蕩10min（或漩渦震蕩10s后置于混勻儀上反應(yīng)10min）。然后將離心管置于磁性分離器上放置2min，用移液器移去上清液并取下離心管。注：此步驟的磁性分離時間應(yīng)不少于2min。

3. 加入 600μL 洗滌液 I（檢查是否已加入異丙醇），漩渦震蕩 30s 或用移液器緩慢吹打磁珠20 次，使磁珠充分重懸，再將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液。

4.加入 600μL 洗滌液 II（檢查是否已加入無水乙醇），漩渦震蕩30s或用移液器緩慢吹打磁珠20次，使磁珠充分重懸，再于室溫下靜置1min 后，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液。注：此步驟應(yīng)盡量除盡洗滌液。

5.保持離心管于磁性分離器上，于室溫下靜置10min后，取下離心管,靜置期間如果離心管底部有多余的液體，用移液槍將其吸出。

6.將離心管從磁力架上取下，置于普通離心管架上，加入100~200μL洗脫液，用移液器緩慢吹打磁珠50 次，使磁珠充分重懸。然后室溫孵育5min，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中，此即為純化得到的基因組DNA，可保存于-20℃。

注意事項：

1. 操作之前，請務(wù)必認(rèn)真閱讀本說明書。 

2. 血液樣品的質(zhì)量對產(chǎn)物DNA的純化量有較大影響，應(yīng)避免反復(fù)凍融血液樣品。 

3. 應(yīng)避免對磁珠進(jìn)行冷凍、離心等操作。

4. 磁珠取用前應(yīng)充分重懸均勻。

5. 磁珠干燥前，應(yīng)使用移液器吸盡洗滌液。 

6. 應(yīng)避免磁珠過度干燥，否則會嚴(yán)重降低核酸洗脫效率。 

7. 建議使用質(zhì)量較好的離心管和移液器吸頭，避免因粘附磁珠而造成損失。 

8. 在96孔板中進(jìn)行磁性分離操作時，磁珠吸附時間可適當(dāng)延長至4~5min。

全血基因組DNA提取試劑he(磁珠法）質(zhì)粒提取

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DM9688  全血基因組DNA提取試劑he(磁珠法） Whole blood genomic DNA extraction kit (magnetic particles)  100T/50T