諾博萊德 微量PCR產(chǎn)物純化回收試劑盒 核酸提取

PCR Purification micro Kit微量 PCR 產(chǎn)物純化回收試劑盒

目錄號(hào):43017

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無水乙醇

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒為超微量 PCR 產(chǎn)物濃縮回收的專用試劑盒。適用于微量 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物純化回收、酶切產(chǎn)物 DNA 片斷純化回收、探針標(biāo)記后純化回收、DNA 樣品濃縮等。使用本產(chǎn)品可回收 100bp-5kb 大小的DNA 片段，回收率可達(dá) 85%-95%。該試劑盒操作簡(jiǎn)便，得到的 DNA 片段可用于酶切、連接、測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.         特殊微量 5μg 離心柱設(shè)計(jì)可以最di 5μl 洗脫，保證了回收 DNA 的高濃度。

2.        特殊無墊圈離心柱的設(shè)計(jì)，最大限度減少了無液體殘留和污染，保證了回收 DNA 的高純度。

3.        快速：步驟少，操作簡(jiǎn)便，整個(gè)操作僅需 15 分鐘。

注意事項(xiàng)：

1.   Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對(duì)吸附柱造成的影響。收到貨后 2 個(gè)月內(nèi)，不用做柱平衡。

2.使用前請(qǐng)先檢查Buffer BL、Buffer DB 是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。

3.   回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。

操作步驟：

第一次使用前，請(qǐng)先在 Buffer WB 中加入無水乙醇，并打?qū)礃?biāo)記，加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。

從 PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收 DNA 片段

1.    柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 50 ul 平衡液Buffer BL，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液，將吸附柱重新放回收集管中。（請(qǐng)使用當(dāng)天處理過的柱子）

2.        加結(jié)合液：每 20 ul PCR 反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液的體積，加入 100 ul 結(jié)合液Buffer DB，充分混勻。

（注意：處理樣品體積：溶膠結(jié)合液體積=1:5）

3.        吸附：將上一步所得溶液加入一套微量吸附柱中，室溫放置 1 min，12,000 rpm 離心 30 sec，棄濾液。

（ 注意：吸附柱容積為 750ul，若樣品體積大于 750ul 可分批加入）

4.        漂洗：加入 300ul Buffer WB，12,000 rpm 離心 30 sec，棄濾液。

5.        二次漂洗：重復(fù)操作步驟 4。

6.   干燥：將吸附柱放回收集管中， 12,000 rpm 離心 2 min，甩干膜上殘留的乙醇，防止其抑制下游反應(yīng)。

7.        洗脫：將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 離心管中，在微量吸附柱的膜中央加入 10 ul (5 ~ 25 ul)洗脫液 Buffer EB，室溫放置 1 min，12,000 rpm 離心 1 min。

（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在 65℃預(yù)熱，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 1 min，再次離心收集。）

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