土壤脫氫酶（Soil dehydrogenase, sDHA）試劑盒說明書

微量法 100T/96S

土壤脫氫酶試劑盒

正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：

土壤脫氫酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤體系內(nèi)活性微生物量以及其對有機物的降解活性，可以作為土壤微生物的降解性能指標(biāo)。

測定原理：

氫受體 2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，TTC）在細(xì)胞呼吸過程中接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），在波長 485nm 處有最大吸收峰，采用分光光度法于 485nm 測定其吸光值，即得土壤脫氫酶活性。

試劑的組成和配制：

試劑一：粉劑×1 瓶，使用前加 10ml 試劑二溶解，4℃避光保存（盡量現(xiàn)配現(xiàn)用）。

自備儀器和用品：

篩子、天平、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水、甲醇（不允許快遞，請用戶自備）。

樣品處理：

新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干，過 30~50 目篩。

測定步驟和操作表：

脫氫酶活力計算：

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.0211x - 0.0312；R2 = 0.9988；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/ml），y 為吸光值。 酶活單位定義：在 37℃時，每克土壤樣品每天催化產(chǎn)生 1μgTF 為一個酶活性單位。 sDHA（μg/ d /g 土樣）=（△A+0.0312）÷ 0.0211×V 反總÷W÷T= 47.39×（△A+0.0312）÷W V 反總：反應(yīng)總體積，1ml；T：培養(yǎng)時間，1d；W：樣品質(zhì)量，g

注意事項:

配制好的試劑一避光保存于 4℃，最好在一周內(nèi)使用，若出現(xiàn)紅色，則不能使用。

土壤脫氫酶試劑盒