諾博萊德 福爾根核酸染色試劑盒 色素染色

NobleRyder G1858 福爾根核酸染色試劑盒，F(xiàn)eulgen Nucleus Stain Kit

產(chǎn)品貨號(hào)：G1858

產(chǎn)品名稱：福爾根核酸染色試劑盒，F(xiàn)eulgen Nucleus Stain Kit

產(chǎn)品規(guī)格：3*50ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：福爾根核酸染色試劑盒

英文名稱：Feulgen Nucleus Stain Kit

規(guī)格：3*50ml

儲(chǔ)存條件：2-8℃，避光保存，有效期6個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder G1858 福爾根核酸染色試劑盒，F(xiàn)eulgen Nucleus Stain Kit產(chǎn)品介紹

脫氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基綠-派洛寧法、吖啶橙熒光法等，其中最經(jīng)dian的是Feulgen法，該法是一種經(jīng)典的組織化學(xué)染色法。

福爾根染色原理在于DNA經(jīng)溫和的弱酸(例如鹽酸)水解后，嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開(kāi)，并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開(kāi)，在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與Schiff試劑結(jié)合，形成紫紅色化合物，使細(xì)胞內(nèi)含有DNA的部位呈紫紅色。紫紅色的產(chǎn)生是因?yàn)榉磻?yīng)產(chǎn)物的分子內(nèi)有醌基,醌基是一個(gè)具有顏色的發(fā)色團(tuán)，所以凡含有DNA的部位就呈紫紅色。該水解作用不影響核糖-嘌呤結(jié)合鍵，因此RNA用此法處理后不分解，所以該法不適用于證明RNA。

操作步驟：(僅供參考)

（一）石蠟切片染色

1. 組織固定：Carnoy 固定石蠟切片較好，10%福爾馬林亦可，不宜采用 Bouin 固定液。

2. 配制弱酸工作液: 按弱酸溶液:蒸餾水=1:4 配制，即取 1 份弱酸溶液、4 份蒸餾水，充分混合，即獲得 弱酸工作液。

3. 石蠟切片脫蠟至蒸餾水。

4. 滴加弱酸工作液，室溫處理切片一下。

5. 切片上滴加預(yù)熱至 60℃的弱酸工作液，孵育 8min。

6. 室溫的弱酸工作液處理切片 1min。

7. 蒸餾水沖洗。

8. 切片上滴加 Schiff 染色液，室溫避光染色 30~60min。

9. 在上述染色過(guò)程中，配制 SO2 水工作液。按弱酸溶液:亞硫酸鹽溶液:蒸餾水=1:5:94 配制，即取弱酸 溶液 1 份、亞硫酸鹽溶液 5 份、蒸餾水 94 份，充分混合，即配即用。

10. 用新鮮配制的 SO2 水工作液洗切片 3 次，每次 90s。

11. 蒸餾水中洗凈。經(jīng)系列乙醇脫水。二甲苯透明并封片。

（二）冰凍切片染色

1. 冰凍切片預(yù)處理：取 1 份乙酸、3 份無(wú)水乙醇混合即為固定液，固定 10min。

2. 由無(wú)水乙醇脫水--逐級(jí)下行—蒸餾水。

3. 配制弱酸工作液：按弱酸溶液:蒸餾水=1:4 配制，即取 1 份弱酸溶液、4 份蒸餾水，充分混合，即獲 得弱酸工作液。

4. 余下步驟同上述石蠟切片染色。

注意事項(xiàng)：

1. 水解時(shí)間很重要，并且應(yīng)使用恰當(dāng)?shù)墓潭〞r(shí)間。不同的固定液水解時(shí)間不一樣。

2. 注意Schiff 染色液的試劑狀態(tài)，若變淺粉紅亦可考慮使用，顏色變紅則棄用。

3. 去除切片上多余Schiff染色液的方法以SO₂水洗為好。

4. 建議進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)。

福爾根核酸染色試劑盒 色素染色

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NobleRyder G1858 福爾根核酸染色試劑盒，F(xiàn)eulgen Nucleus Stain Kit 3*50ml