NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE

DEAE磁珠 Magrose DEAE 蛋白純化磁珠

產(chǎn)品貨號(hào)：M0128

產(chǎn)品名稱：DEAE磁珠 Magrose DEAE

產(chǎn)品規(guī)格：5mL/100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE

NobleRyderM0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE是一種弱陰離子交換磁珠，具有快速的磁響應(yīng)性、豐富的離子交換能力和ji高的蛋白結(jié)合能力。離子交換配基為二乙an乙基（diethylaminoethyl，DEAE），該配基在 pH3-12的工作范圍內(nèi)仍然能夠保持穩(wěn)定的高蛋白結(jié)合能力。

與傳統(tǒng)柱層析純化方式相比，MagroseDEAE 磁珠無(wú)需對(duì)粗蛋白樣品進(jìn)行預(yù)處理（如：反復(fù)繁瑣的離心，費(fèi)時(shí)費(fèi)力的過(guò)濾操作），此外，無(wú)需控制流速及柱壓，不需要昂貴的層析設(shè)備。對(duì)于熟練的操作者來(lái)說(shuō)，在很短時(shí)間內(nèi)就能完成高純度目的蛋白的提取，且能輕松實(shí)現(xiàn)多個(gè)樣品的平行處理，實(shí)現(xiàn)高通量的蛋白純化。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1. 磁響應(yīng)速度快，減少操作時(shí)間

2. 磁珠具有良好的分散性和重懸性，提高操作的便捷性

3. 配基具有良好的物理化學(xué)穩(wěn)定性，提高了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性及可重復(fù)性

操作流程（以純化含 BSA 蛋白樣品為例）

1. 磁珠預(yù)處理（平衡）：將MagroseDEAE 磁珠漩渦振蕩 30s，使磁珠充分重懸；取一定量的 10%（v/v）磁珠懸液置于 50mL 離心管中。對(duì)磁珠懸液進(jìn)行磁性分離，棄上清液，加入 20mL 平衡緩沖液洗滌磁珠 3 次，每次垂直混合2min。

注：為了獲得目標(biāo)蛋白的最大回收率，實(shí)驗(yàn)者需要加入過(guò)量的MagroseDEAE磁珠，一般大于蛋白結(jié)合量的20%即可。對(duì)于含較低豐度目標(biāo)蛋白的樣品中，磁珠對(duì)目標(biāo)蛋白的回收率會(huì)有所降低，因此需要繼續(xù)增大磁珠的用量；

2. 蛋白吸附：將預(yù)處理的磁珠加入含 BSA 蛋白的樣品溶液中，漩渦振蕩 30s，置于垂直混合儀混勻30~60min，使樣品和磁珠充分接觸并吸附，然后進(jìn)行磁性分離，移棄上清液。

注：為了更有效率的吸附結(jié)合物質(zhì)，平衡緩沖液最好含有較低的離子強(qiáng)度，選擇的 pH 值應(yīng)該至少與目標(biāo)蛋白的等電點(diǎn)相差一個(gè) pH 單位，選定的鹽緩沖液 pH 波動(dòng)在 0.5pH 以內(nèi)。目標(biāo)蛋白與磁珠的吸附時(shí)間與蛋白的本身屬性有關(guān)

3.磁珠洗滌：加入 20mL 的平衡緩沖液，漩渦振蕩重懸磁珠 30s 后進(jìn)行磁性分離，移棄上清液；

該操作重復(fù) 3 次。

4.蛋白洗脫：在上述完成磁珠洗滌的離心管中加入適量的洗脫液進(jìn)行蛋白洗脫。用移液器吹打或者渦旋振蕩下迅速重懸，然后將離心管置于垂直混合儀混勻 10~15min 后進(jìn)行磁性分離，收集上清液至新的離心管中。洗脫方式主要有高鹽濃度洗脫（含1-2M的NaCl的平衡緩沖液）和低pH 洗脫（選擇低于目標(biāo)蛋白等電點(diǎn)的pH范圍即可）兩種。

5. 磁珠再生：一般采用2MNaCl溶液洗滌3~5 次，然后用平衡緩沖液進(jìn)行再平衡處理。磁珠多次使用后會(huì)有沉淀蛋白、強(qiáng)疏水性蛋白、脂蛋白等雜質(zhì)非特異性吸附到磁珠上，為了保證磁珠的使用效率，建議進(jìn)行在位清洗（CIP）。

6. 在位清洗（CIP）：依次采用1.0MNaOH、70%乙醇或 30%異丙醇、純化水洗滌磁珠2次；最后加入20%乙醇重懸磁珠，置于2~8℃保存。

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品不宜冷凍、干燥或離心操作。冷凍、干燥和離心等操作會(huì)引起磁珠團(tuán)聚，不易于重懸和

分散，并且影響磁珠表面功能基團(tuán)的化學(xué)活性。

2. 在使用本產(chǎn)品前，請(qǐng)務(wù)必充分振蕩或超聲使磁珠保持均勻的懸浮狀態(tài)。

3. 使用過(guò)程中可根據(jù)需求，用純化水或緩沖液磁吸洗滌磁珠2~3 次，以去除保存液中乙醇。

4. 本產(chǎn)品需與磁性分離設(shè)備配套使用。

5. 鹽濃度與pH值均會(huì)影響特異性蛋白的結(jié)合與洗脫，客戶需自行摸索不同蛋白的結(jié)合和洗脫條件，以保證蛋白純化量和純度。

6. 本產(chǎn)品僅供研究使用。

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M0128 DEAE磁珠 Magrose DEAE 5mL/100ml