考馬斯亮藍(lán)G250染料試劑  凝膠染色

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

考馬斯亮藍(lán) G250 染料試劑由考馬斯亮藍(lán) G250、乙醇、磷酸等組成，用于考馬斯染料結(jié)合(Bradford)分析的總蛋白測(cè)量,其特點(diǎn)在于對(duì)蛋白樣品中可能存在的大多數(shù)鹽、溶劑、緩沖液、硫醇、金屬螯合劑、還原性物質(zhì)等均不排斥，檢測(cè)濃度下限達(dá)到 25ug/ml，最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5μg，待測(cè)樣品體積為1~20ul，在50~1000ug/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

自備材料:

1、酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)

2、蒸餾水、96 孔板或比色杯

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

操作步驟(僅供參考):

1、 稀釋蛋白標(biāo)準(zhǔn)(一般為 BSA 5mg/ml)使其終濃度為 0.5mg/ml。注意:蛋白樣品在什么溶液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)用什么溶液稀釋，也可以用0.9%NaCl或 PBS稀釋蛋白標(biāo)準(zhǔn)

2、將標(biāo)準(zhǔn)品按 0,1,2,4,8,12,16,20ul加到 96 孔板的蛋白標(biāo)準(zhǔn)孔中，加蛋白標(biāo)準(zhǔn)稀釋液補(bǔ)足至 20ul。

3、加適當(dāng)體積樣品到 96 孔板的樣品孔中，補(bǔ)加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液至 20m。

4、各孔加入 200ul考馬斯亮藍(lán) G250染料試劑，室溫放置3~5min。

5、酶標(biāo)儀測(cè)定 595nm 波長(zhǎng)處的吸光值，560~610nm 之間的波長(zhǎng)也可。

6、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。

注意事項(xiàng):

1、 待測(cè)蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)溶解于什么樣的稀釋液中，否者待測(cè)蛋白與蛋白標(biāo)準(zhǔn)中所含非蛋白成分不一致，有可能導(dǎo)致測(cè)定不準(zhǔn)確。

2、 需可檢測(cè) 560~610nm 之間波長(zhǎng)的酶標(biāo)儀一臺(tái)，優(yōu)良檢測(cè)波長(zhǎng)為 595nm。

3、 建議每次測(cè)定時(shí)都做標(biāo)準(zhǔn)曲線，因?yàn)闇y(cè)定時(shí)顏色會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)不斷加深，并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān)，所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度，否則如需精確測(cè)定應(yīng)每次都做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4、如果沒有酶標(biāo)儀，也可以使用普通的分光光度計(jì)測(cè)定，但測(cè)定時(shí)應(yīng)考慮根據(jù)比色皿的最小檢測(cè)體積;應(yīng)按比例適當(dāng)加大考馬斯亮藍(lán) G250 染料試劑的用量使總體積不小于最小檢測(cè)體積，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的用量亦相應(yīng)按比例放大;使用分光光度計(jì)測(cè)定蛋白濃度時(shí)，每個(gè)試劑盒可以測(cè)定的樣品數(shù)量可能會(huì)顯著減少。

5、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

6、試劑開封后請(qǐng)盡快使用，以防影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)效果。

有效期:12個(gè)月有效。

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